乙型肝炎病毒(HBV)感染仍然是一个全球性的健康问题，全球有超过3.64亿的慢性携带者。 进一步探索HBV复制的分子机制可能提供针对HBV的新策略。 Neddylation作为翻译后修饰之一在调节病毒感染中起重要作用。它由Nedd8激活酶E1(NAE1)的连续激活触发。最近的研究证实，HIV可以利用neddylation诱导宿主限制因子SAMHD1H的降解，从而支持其生存。

浙大一附院研究人员探讨了neddylation在HBV生命周期中的作用和机制，并进一步研究neddylation抑制对HBV的影响。相关结果发表在 2018 美国肝病学会(AASLD)年会上。

研究方法

NAE1抑制剂 Pevonedistat 和 siNAE1 用于阻断 neddylation 。 HepG2.2.15，pHBV1.3 转染的 HepG2 和 Huh7 细胞用于体外研究。 通过 pHBV1.3 流体动力学注射建立HBV感染的小鼠模型。 通过ELISA检测HBsAg和HBeAg水平。 通过qPCR和Western印迹分析评估感兴趣基因的HBV DNA，mRNA和蛋白质表达水平。 通过CCK8测定评估细胞活力。使用荧光素酶报告基因测定法测定启动子的活性。 通过免疫组织化学检测肝脏HBc表达。

研究结果

通过使用非细胞毒性浓度的 Pevonedistat(400nM)或敲除 HepG2.2.15 和 pHBV1.3 转染的 Huh7 和 HepG2细胞中的NAE1，我们发现 Pevonedistat 处理或NAE1敲低均显著降低HBsAg，HBeAg和HBV DNA水平并降低HBV细胞模型中的病毒启动子活性。 此外，与载体治疗相比，Pevonedistat 治疗的HBV感染小鼠血清HBsAg，HBeAg和HBV DNA较低。 此外，研究还揭示了在Pevonedistat处理下HBV细胞模型中转录因子肝细胞核因子4α(HNF4α)的表达受到抑制，并且在 Pevonedistat 处理后HBV小鼠模型中的肝HBc和HNF4α表达也降低。

研究结论

研究结果表明NAE1抑制的 neddylation 阻断在体外和体内抑制HBV复制和转录。 Pevonedistat 可能有望成为HBV抗病毒治疗的潜在药物。